Método baseado na norma DIN EN ISO 8968-4:2016 – Leite e produtos lácteos – Determinação do teor de nitrogênio proteico e do teor de nitrogênio não proteico e cálculo do teor real de proteínas
Introdução
O leite e os produtos lácteos contêm proteínas de alta qualidade que os seres humanos podem utilizar especialmente bem e usar para construir as próprias proteínas do corpo. As proteínas do leite não são apenas importantes na produção de produtos lácteos tradicionais, mas também desempenham um papel importante em uma ampla gama de produtos alimentícios, como alimentos para bebês e no setor farmacêutico, devido às suas diversas propriedades funcionais e alto valor nutricional-fisiológico.
Consequentemente, o teor de proteínas do leite tem um papel significativo na determinação do preço.
As proteínas do leite essencialmente consistem em caseína, proteínas do soro (whey) e nitrogênio não proteico (NPN).
O nitrogênio não proteico é o componente da proteína bruta que não pode ser processado pelos seres humanos e, portanto, é distinguido da chamada proteína real ou pura.
O nitrogênio não proteico é um componente crucial da composição do leite
Ele possui vários compostos nitrogenados que não são proteínas, mas ainda assim são de grande importância para avaliar a qualidade e a segurança do produto. O nitrogênio não proteico é composto por creatina/creatinina, peptídeos, ácidos hipúricos, aminoácidos livres, ácido orótico, ácido úrico, amônia e ureia, sendo que a ureia constitui a maior parte. Portanto, para determinar o teor de proteína relevante, o teor de NPN deve ser subtraído do teor de proteína com o seguinte
Proteína pura = proteína bruta – nitrogênio não proteico
Equipamentos Gerhardt
Kjeldahltherm KT20
Vapodest 500
Vacusog
Equipamento adicional:
▪ Balança analítica
▪ Misturador
▪ Banho-maria
▪ Estação de filtração
▪ Capela de exaustão
No campo do controle de qualidade de produtos lácteos e análise nutricional, a determinação precisa do nitrogênio não proteico (NPN) no leite e nos produtos lácteos desempenha um papel central. A determinação do nitrogênio não proteico é relevante porque o teor de proteína pode ser aumentado artificialmente pela adição de outras substâncias com alto teor de nitrogênio.
Um exemplo disso é o escândalo da melamina na China há alguns anos – a melamina, um produto químico industrial, foi adicionada ao leite em pó para aumentar o teor de proteínas. Uma determinação pura de nitrogênio segundo Kjeldahl atinge seus limites aqui e mostraria um teor de proteína muito alto.
No entanto, a determinação do nitrogênio não proteico também é usada para tirar conclusões sobre a qualidade da ração animal – com base nos resultados da análise de nitrogênio não proteico/ureia, o conteúdo ou a sequência das rações podem ser ajustados para otimizar os custos de alimentação, a produção de leite e a redução do desperdício de nitrogênio no meio ambiente.
Preparação da amostra
As amostras líquidas são transferidas para um béquer e aquecidas a uma temperatura de 38-40 °C em um banho-maria. A amostra a ser analisada é então resfriada à temperatura ambiente com uma mistura cuidadosa e pesada em um frasco de Erlenmeyer. Ácido tricloroacético é então adicionado à amostra de leite e a mistura leite-ácido é pesada novamente.
Após a formação do precipitado, o conteúdo do balão cônico é filtrado e o filtrado é coletado em um balão cônico limpo e seco. O filtrado é pesado por pesagem diferencial com uma seringa descartável.
Amostras sólidas são homogeneizadas com um mixer ou moinho de rotor, se necessário, e uma quantidade apropriada da amostra é dissolvida em água a 40-50 °C. O precipitado é formado pela adição de ácido tricloroacético, que é filtrado após aquecimento breve da suspensão. O filtrado pode ser pesado com uma seringa descartável. O filtrado deve estar claro e livre de partículas. Se não for o caso, a precipitação e a filtração são repetidas.
Digestão
A amostra é digerida em ácido sulfúrico concentrado a 410 °C. O filtrado não tende a espumar, mas ainda deve ser aquecido cuidadosamente e observado. Com os padrões oficiais, o tempo de digestão é de 2,5 horas, enquanto com um método otimizado, o tempo de digestão pode ser reduzido para cerca de 2 horas. Nota de aplicação: Reduza o tempo de digestão colocando as amostras em um bloco de digestão pré-aquecido.
Destilação e titulação
Após a digestão, a amostra é destilada com a adição de H2 O e NaOH em um receptor feito de H3 BO3 . A determinação do ponto final é realizada automaticamente no VAPODEST 500. A adição de um indicador de mistura não é necessária, mas pode ser usada para controle visual.
Cálculo dos resultados
O teor de nitrogênio não proteico é calculado dependendo do valor em branco previamente determinado dos pesos anotados, os pesos da amostra, da mistura ácido-amostra e do filtrado, bem como do consumo da solução titulante. Nota de aplicação: Use nossa planilha Excel já preparada para o cálculo, que teremos o prazer de fornecer.
Para leite e produtos lácteos, o teor de proteína é de grande importância para avaliar a qualidade e determinar o preço. Portanto, é importante para a análise também determinar o teor de proteína “verdadeira” no leite. A análise de nitrogênio não proteico com KJELDATHERM e VAPODEST fornece aos laboratórios um valor importante para determinar o teor real de proteínas.
